amidaza (AMD)
Enzimi:Budući da su makromolekularni biološki katalizatori, većina enzima su proteini
Amidaza:Katalizira hidrolizu raznih endogenih i stranih alifatskih i aromatskih amida prijenosom acilne skupine u vodu uz proizvodnju slobodnih kiselina i amonijaka.Hidroksaminska kiselina i druge organske kiseline naširoko se koriste kao lijekovi jer su sastavni dijelovi faktora rasta, antibiotika i inhibitora tumora.Amidaze se mogu podijeliti na R tip i S tip acilaze prema stereoselektivnosti katalizatora.
Uz kataliziranje hidrolize amida, amidaza također može katalizirati reakcije prijenosa acila u prisutnosti ko-supstrata kao što je hidroksilamin.
Amidaze s različitim izvorima imaju različitu specifičnost supstrata, neke od njih mogu hidrolizirati samo aromatske amide, neke od njih mogu hidrolizirati samo alifatske amide, a neke hidroliziraju α- ili ω-amino amide.Većina amina ima dobru katalitičku aktivnost samo za acikličke ili jednostavne aromatske amide, ali za složene aromate, heterociklički amidi, posebno amidi s orto supstituentima, općenito su niske aktivnosti (samo nekoliko enzima pokazuje bolje katalitičke učinke).
Katalitički mehanizam:
| Enzimi | Šifra proizvoda | Šifra proizvoda |
| Enzimski prah | ES-AMD-101 ~ ES-AMD-119 | set od 19 amidaza, 50 mg svaka 19 komada * 50 mg / komad, ili druga količina |
| Komplet za provjeru (SynKit) | ES-AMD-1900 | set od 19 amidaza, 1 mg svaka 19 stavki * 1 mg / kom |
★ Visoka specifičnost supstrata.
★ Jaka kiralna selektivnost.
★ Visoka učinkovitost pretvorbe.
★ Manje nusproizvoda.
★ Uvjeti blage reakcije.
★ Ekološki prihvatljiv.
➢ Probir enzima treba provesti za specifične supstrate zbog specifičnosti supstrata i dobiti enzim koji katalizira ciljni supstrat s najboljim katalitičkim učinkom.
➢ Nikada ne dolazite u kontakt s ekstremnim uvjetima kao što su: visoka temperatura, visok/nizak pH i organsko otapalo visoke koncentracije.
➢ Normalno, reakcijski sustav treba uključivati supstrat, pufersku otopinu (optimalni reakcijski pH enzima).Ko-supstrati kao što je hidroksilamin trebaju biti prisutni u reakcijskom sustavu prijenosa acila.
➢ AMD treba dodati posljednji u reakcijski sustav s optimalnim pH i temperaturom reakcije.
➢ Sve vrste AMD-a imaju različite optimalne reakcijske uvjete, tako da svaki od njih treba dodatno proučavati zasebno.
Primjer 1(1):
Aktivnost hidrolize na različite amidne supstrate
| Podloga | Specifična djelatnost μmol min-1mg-1 | Podloga | Specifična djelatnost μmol min-1mg-1 |
| Acetamid | 3.8 | ο-OH benzamid | 1.4 |
| Propionamid | 3.9 | p-OH benzamid | 1.2 |
| Laktamid | 12.8 | ο-NH2benzamid | 1.0 |
| Butiramid | 11.9 | p-NH2benzamid | 0.8 |
| Izobutiramid | 26.2 | ο-Toluamid | 0.3 |
| Pentanamid | 22.0 | p-Toluamid | 8.1 |
| heksanamid | 6.4 | nikotinamid | 1.7 |
| Cikloheksanamid | 19.5 | Izonikotinamid | 1.8 |
| Akrilamid | 10.2 | Picolinamid | 2.1 |
| metakrilamid | 3.5 | 3-fenilpropionamid | 7.6 |
| Prolinamid | 3.4 | Indol-3-acetamid | 1.9 |
| Benzamid | 6.8 |
Reakcija je provedena u 50 mM otopini natrijevog fosfatnog pufera, pH 7,5, na 70 ℃.
| Amidi | Hidroksilamin | Hidrazin |
| Acetamid | 8.4 | 1.4 |
| Propionamid | 18.4 | 3.0 |
| Izobutiramid | 25.0 | 22.7 |
| Benzamid | 9.2 | 6.1 |
Reakcija je provedena u 50 mM otopini natrijevog fosfatnog pufera, pH 7,5, na 70 ℃.
Povezana koncentracija reagensa: amidi, 100 mM (benzamid, 10 mM);hidroksilamin i hidrazin, 400 mM;enzim 0,9 μM.
Primjer 2(2):
Primjer 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Ekstremofili, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Procesna biokemija, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Bioorganic Chemistry, 2017, dostupno online 7.
